张帆
,
倪晔
,
孙志浩
,
郑璞
,
林文清
,
朱坡
,
居年丰
催化学报
考察了水/离子液体两相体系中出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans CGMCC 1244)催化 4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)不对称还原生成光学活性(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯((S)-CHBE)的性能,并对反应条件如摇床转速、相体积比、温度、初始底物浓度和pH值等进行了优化. 结果表明,在水/1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐体系中,出芽短梗霉催化COBE不对称还原生成(S)-CHBE, 在30 ℃, pH 6.6, 摇床转速180 r/min和不对称反应 8 h 条件下,反应物的转化率、产物ee值和浓度分别达到95.6%, 98.5%和47.1 g/L. 在控制pH值为6.6的情况下,通过分添加底物可有效提高产物(S)-CHBE浓度至75.1 g/L.
关键词:
离子液体
,
全细胞
,
出芽短梗霉
,
4-氯-乙酰乙酸乙酯
,
不对称还原
,
(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯
宿宇宁
,
倪晔
,
王骏超
,
徐志豪
,
孙志浩
催化学报
doi:10.1016/S1872-2067(11)60436-1
克隆了来自于枯草芽孢杆菌的羰基还原酶基因IolS和葡萄糖脱氢酶基因GDH,采用Ni-NTA镍亲和层析柱对重组蛋白IolS进行纯化,并对纯酶进行了酶学性质研究.结果表明,该羰基还原酶的最适温度和pH值分别为30℃和6.0；在40℃以下具有较好的热稳定性；在pH 5.5-7.0的偏酸性范围内能保持75％以上的酶活.采用三种策略构建了IolS和GDH的共表达重组质粒,结果发现,采用双启动子的重组质粒能够实现羰基还原酶IolS的高效表达,粗酶液中的IolS和GDH的比酶活均达到1.5 U/mg.运用该重组菌对10 g/L的OPBE进行不对称还原,反应15h后,底物转化率大于99％,产物(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的ee值达到99.5％.
关键词:
羰基还原酶
,
葡萄糖脱氢酶
,
共表达
,
(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯
,
不对称还原
倪晔
,
张蓓花
,
孙志浩
催化学报
doi:10.1016/S1872-2067(11)60363-X
考察了利用安大略假丝酵母(Candida ontarioensis)静息细胞不对称催化2-氯-1-(3-氯苯基)乙酮合成(R)-2-氯-1-(3-氯苯基)乙醇的转化反应条件.结果表明,当底物浓度为10g/L时,在最适转化条件下反应72 h,产物的ee值和产率分别达到99.9％和99.0％.采用4g/L十六烷基三甲基溴化铵对Candida ontarioensis细胞于4c通透性处理20 min后,全细胞的酶活提高2倍以上.当底物浓度提高为30g/L,转化24 h后,产物的ee和产率分别达到99.9％和97.5％.该研究为高效制备(R)-2-氯-1-(3-氯苯基)乙醇提供了可行途径,并为生物催化合成芳基手性醇类手性中间体提供了理论指导.
关键词:
(R)-2-氯-1-(3-氯苯基)乙醇
,
不对称还原
,
十六烷基三甲基溴化铵
,
通透性
,
安大略假丝酵母
