毛白杨环氧水解酶的异源表达及其在催化拆分手性环氧化物中的应用

催化学报 , 2012, 33(2): 302-307. doi: 10.3724/SP.J.1088.2012.10832

毛白杨环氧水解酶的异源表达及其在催化拆分手性环氧化物中的应用

赵晶 ^1, , 鞠鑫 ^2, , 潘江 ^3, , 李春秀 ^4, , 王敏杰 ^5, , 许建和 ^6,

1.华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海200237

2.华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海200237

3.华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海200237

4.华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海200237

5.中国林业科学研究院林业研究所,北京100091

6.华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海200237

基金项目: 国家重点基础研究发展计划(973计划)(2009CB724706) 国家自然科学基金(20902023)

关键词：毛白杨 , 环氧水解酶 , 异源表达 , 缩水甘油苯基醚 , 对硝基苯乙烯氧化物 , 催化拆分

Heterogeneous Expression of Epoxide Hydrolase Genes from Populus Tomentosa and Application of the Enzyme for Biocatalytic Resolution of Chiral Epoxides

对已公布的全基因组进行检索发现,杨树(Populus tomentosa)至少含有24个预测为可溶性环氧水解酶的基因.从中选取了7个可能的环氧水解酶基因进行克隆,通过扩增得到其中5个毛白杨(Populus tomentosa Carr)环氧水解酶基因.序列分析显示,它们与已克隆的巨大芽胞杆菌环氧水解酶的同源性仅为24％～26％.对该系列基因进行了在E.coli中的异源表达,并将得到的5个环氧水解酶(PTEH 1～5)用于缩水甘油苯基醚和对硝基苯乙烯氧化物的酶促水解反应.结果发现,其中3个重组酶具有显著的环氧水解酶活性.进一步研究表明,PTEH1和PTEH2对于缩水甘油苯基醚显示了一定的反常规的(R)-选择性,而PTEH5则优先水解(S)-构型的缩水甘油苯基醚.因此,毛白杨中环氧水解酶表现出多样性.

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