杜氏盐藻多糖的高效体积排阻色谱的保留特性及其分析方法的研究

色谱 , 2006, 24(6): 560-565. doi: 10.3321/j.issn:1000-8713.2006.06.005

杜氏盐藻多糖的高效体积排阻色谱的保留特性及其分析方法的研究

戴军 ^1, , 尹鸿萍 ^2, , 陈尚卫 ^3, , 朱松 ^4, , 顾小红 ^5, , 王旻 ^6, , 汤坚 ^7,

1.江南大学分析测试中心,江苏,无锡,214036;江南大学,食品科学与安全教育部重点实验室,江苏,无锡,214036

2.中国药科大学生命科学学院,江苏,南京,210009

3.江南大学分析测试中心,江苏,无锡,214036

4.江南大学分析测试中心,江苏,无锡,214036

5.江南大学分析测试中心,江苏,无锡,214036

6.中国药科大学生命科学学院,江苏,南京,210009

7.江南大学分析测试中心,江苏,无锡,214036;江南大学,食品科学与安全教育部重点实验室,江苏,无锡,214036

关键词：高效体积排阻色谱 , 相对分子质量分布 , 多糖 , 杜氏盐藻

Study on the Retention Behaviors and Analytical Methods of Polysaccharides from Duanaliella salina by High Performance Size-Exclusion Chromatography

通过对从杜氏盐藻中提取出的不同多糖级分在高效体积排阻色谱柱(Waters Ultrahydragel Linear,7.8 mm i.d.×300 mm,2根串联)上的保留特性的考察及其分离分析条件的优化,建立了高效体积排阻色谱分析盐藻多糖平均相对分子质量及其分布的方法.结果表明:流动相中盐的种类及其浓度、pH值对3种酸性多糖级分(特别是硫酸化多糖级分PD4a)的保留行为有显著影响;在柱温为45 ℃,流速为0.9 mL/min条件下,使用0.1 mol/L的NaAc水溶液作流动相基本上能消除非特异性吸附作用及分子间缔合等因素的干扰,使各多糖级分基本以非缔合状态按立体排除机制保留和分离.在优化的色谱条件下,测得的盐藻多糖5个级分的重均相对分子质量(Mw)分别为1 548 000,33 000,67 000,424 000,10 000;测得的硫酸化多糖级分PD4a的Mw和峰面积的相对标准偏差分别为1.7%和 0.88%(n=5).

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