金属硫蛋白的色谱/电喷雾电离质谱联用表征方法

色谱 , 2004, 22(6): 589-594. doi: 10.3321/j.issn:1000-8713.2004.06.005

金属硫蛋白的色谱/电喷雾电离质谱联用表征方法

黄志勇 ^1, , 沈金灿 ^2, , 庄峙厦 ^3, , 王小如 ^4, , 黎先春 ^5,

1.集美大学生物工程学院,福建,厦门,361021

2.厦门大学化学系,现代分析科学教育部重点实验室,福建,厦门,361005

3.厦门大学化学系,现代分析科学教育部重点实验室,福建,厦门,361005

4.厦门大学化学系,现代分析科学教育部重点实验室,福建,厦门,361005;国家海洋局第一海洋研究所,山东,青岛,266061

5.国家海洋局第一海洋研究所,山东,青岛,266061

基金项目: 福建省重点招标项目(2003Y005-04) 教育部重点实验室基金(B40402) 国家自然科学基金(20175022)

关键词：金属硫蛋白 , 联用技术 , 反相液相色谱 , 电喷雾电离质谱

Characterization Method for Metallothioneins by Reversed-Phase Liquid Chromatography Coupled with Electrospray Ionization Mass Spectrometry

通过反相液相色谱(RPLC)与电喷雾电离质谱(ESI-MS)的联用技术,对镉诱导金属硫蛋白标准物质MT-1和MT-2的结构进行表征分析.采用Vydac C8 反相色谱柱(250 mm×2.1 mm i.d., 5 μm, 30 nm),流动相A为pH 6.0的5 mmol/L乙酸铵水溶液,流动相B为pH 6.0的5 mmol/L乙酸铵的甲醇-水(体积比为1∶1)溶液,流动相流速为0.20 mL/min,在40 min内流动相B的体积分数从10%增加到37.5%进行梯度洗脱.分别用紫外(UV)和ESI-MS检测,可获得总离子流色谱图及与其色谱峰对应的质谱图.通过对MT-1和MT-2的质谱信号的解析,发现通过该法获得的MT结构形态大多与前人报道的结果吻合.还测定了兔肝MT的多形态结构,利用酸化脱金属硫蛋白(apo-MT)使谱图简化,可清晰地获得在兔肝中存在的各种MT亚型和次亚型结构形态.

参考文献

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